孕酮(PROG)放免試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該注意哪些！

孕酮是由卵巢黃體分泌的一種天然孕激素，在體內(nèi)對(duì)雌激素激發(fā)過的子宮內(nèi)膜有顯著形態(tài)學(xué)影響，為維持妊shen所必需。黃ti酮用于先兆性LIU產(chǎn)、習(xí)慣性LIU產(chǎn)等閉經(jīng)或閉經(jīng)原因的反應(yīng)性診斷等。

[使用目的]
用于定量測(cè)定人血清（或血漿）中孕酮（PROG）的濃度。

[用途]
孕酮是一種含 21 碳原子的重要雌性激素，主要由卵巢，腎上腺和妊shen時(shí)胎盤產(chǎn)生。孕酮在血液循環(huán)中代謝很快,半衰期為 5 分鐘,產(chǎn)物為孕二醇,孕二醇在肝臟內(nèi)與葡萄糖醛酸結(jié)合成水溶性的葡萄糖醛酸孕二醇,經(jīng)腎臟排出，其生理作用是保證受精卵著床和維持妊shen。上孕酮的測(cè)定主要用于確定排卵，孕激素治療監(jiān)測(cè)和早期妊shen狀態(tài)的評(píng)價(jià)以及在判斷黃體功能狀態(tài)方面等具有重要意義。本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理：含孕酮（PROG）的樣品和 125I 標(biāo)記的孕酮衍生物與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及PEG，使免疫復(fù)合物沉淀，離心，測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中孕酮（PROG）的濃度。

[實(shí)驗(yàn)方法]
A B C D E F G （單 位）
0 0.3 1.1 3.5 10 20 80 ng/mL
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作；
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào)，所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)；
3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中；
4、 每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液；
5、 每管均各加入 200µl 抗體工作液，充分混勻；
6、 37℃溫育 1.0 小時(shí)；
7、 每管均各加入 1000µl 分離劑后，充分混勻；
8、 室溫放置 5~10 分鐘后，離心 3500 轉(zhuǎn)／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
9、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定各管計(jì)數(shù)CPM. 檢測(cè)時(shí)間: 1 分鐘
10、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

[實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意]
1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分，效率應(yīng)≥75％；
2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí)，應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎，以避免造成放射性污染；
3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于zui高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1：2 或 1：
4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試，測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

孕酮(PROG)放免試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該注意哪些！